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詳細信息

【細胞平臺】線粒體膜電位檢測/ROS活性氧檢測

 實驗原理

ROS活性氧檢測:利用熒光探針DCFH-DA進行活性氧的檢測。DCFH-DA本身沒有熒光,可以自由穿過細胞膜,進入細胞內后,可以被細胞內的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透細胞膜,從而使探針很容易被裝載到細胞內。細胞內的活性氧可以氧化無熒光的DCFH生成有熒光的DCF,檢測DCF的熒光就可以知道細胞內活性氧的水平。

線粒體膜電位檢測(JC-1):JC-1為陽離子脂質熒光染料,有單體和多聚體兩種存在狀態,兩者的發射光譜不同。正常健康線粒體的膜電位(△y)具有極性,JC-1依賴于△y的極性被迅速攝入線粒體內,并因濃度增高而在線粒體內形成多聚體,多聚體發射光為紅色熒光;而細胞發生凋亡時,線粒體跨膜電位被去極化,JC-1從線粒體內釋放,紅光強度減弱,以單體的形式存在于胞質內,發綠色熒光。

實驗流程【線粒體膜電位檢測(JC-1)】

 

線粒體膜電位檢測.png

 

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