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ELISA試劑盒實驗操作技巧

  ELISA試劑盒在國內有許多種叫法,例如:ELISA檢測試劑盒、ELISA Kit、酶聯免疫試劑盒、酶聯免疫吸附測定試劑盒、酶聯免疫法分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見的叫法是 ELISA檢測試劑盒、酶聯免疫吸附測定試劑盒等;ELISA試劑盒適用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗體ELISA檢測,自從60-70年代問世以來,得到全世界科研工作者的認可及推崇,在歐美及中國獲得很大的推廣,尤其是國內生化領域的長足發展。

  Elisa生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩定、易保存,操作簡便,結果判斷較客觀等因素,已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中。為了保證ELISA試劑盒實驗質量,我們需要掌握一些小技巧以助于實驗的成功,那么ELISA試劑盒的操作技巧您知道嗎?

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  如若您掌握了這些實驗技巧之后,在做ELISA實驗中,試驗起來會更熟練,大大的降低了實驗過程中的風險,ELISA試劑盒實驗的入門新手掌握了這些知識后,操作起來都會快的多。推薦閱讀:elisa競爭法方法學質量的初步驗證

  ELISA試劑盒17個相關操作技巧如下:

  1.切記在加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。

  2.合理安排檢測量,以免反應板過多造成洗板等待時間長。

  3.在吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。

  4.務必做雙孔實驗,這樣才既能保證數據的準確性,又能反映出試劑盒的精密度。

  5.樣品稀釋液應用加液器加注,并經常校對其準確性。

  6.為防止樣品蒸發,試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜。

  7.未使用完的酶標板或者試劑,請于2-8℃保存。辣根過氧化物酶標記抗人IgG工作液請依據所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過的辣根過氧化物酶標記抗人IgG工作液。

  8.ELISA試劑盒實驗中,加樣后及時放人孵箱,標本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗徹底。

  9.剩余樣品及廢棄物應經121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘,或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。

  10.人ELISA試劑盒洗滌時各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。

  11.每次實驗留一孔作為空白調零孔,該孔不加任何試劑,只是最后加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調OD值至零。

  12.手工洗板時每次加入洗滌液后。應靜置15~30s,不要將一個酶標孑L中的洗滌液濺入另一酶標孔中,防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標板放在毛巾或吸水紙上拍干。

  13.對樣本的結果有疑問時需要使用其他檢測方法進行驗證。

  14.沒有去離子水或雙蒸水時,可以使用娃哈哈純凈水配制溶液,切勿使用自來水。

  15.在使用微量加樣器時,吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭,即使吸取標準品溶液。

  16.吸取液體時速度不易太快,以免產生氣泡,人ELISA試劑盒吸取的量不夠準確。

  17.吸取液體時要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸,減少誤差。

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